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人肌酸激酶CK elisa试剂盒现货供应

发表时间:2024-11-05

人肌酸激酶CK elisa试剂盒现货,产地直供


【检测原理】

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被肌酸激酶抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肌酸激酶呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

【样品收集、处理及保存方法】

1. 样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根化物酶(HRP)的剂。

2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。

3. 植物萃取液或其它相关样本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测。

4. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

【自备物品】

1. 酶标仪(450nm

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3. 37℃恒温箱


【操作步骤】

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL

3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物AB50μL37℃避光孵育15min

7. 每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。



【操作注意事项】

1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3. 浓度为0S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5. 所有液体组分使用前充分摇匀。


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